Kromasil C18 反相色谱柱：填料特性、系列选型与应用综述

摘要：Kromasil 作为 Nouryon（原阿克苏诺贝尔）旗下经典球形硅胶色谱填料品牌，其 C18 系列是制药、多肽纯化、原料药质量研究领域广泛使用的反相固定相（USP L1）。依托高规整全多孔球形硅胶基质，兼具优异机械强度、批次重现性与可放大能力，衍生 Classic、C18 (w)、EternityXT、EternityShell 多条产品线，覆盖常规小分子、极性亲水样品、碱性药物、快速 UHPLC 筛查等场景，是从分析方法开发到 DAC 大规模制备纯化的优选 C18 体系。

进口试剂就选上海宝叶生物  

关键词：Kromasil；C18；反相色谱；HPLC；制备色谱；多肽纯化；宽 pH 硅胶

1 基质与填料核心特点

Kromasil 硅胶采用高纯度全多孔单分散球形二氧化硅，颗粒表面光滑、孔径分布窄，无明显微凹陷缺陷，是该填料最核心的底层优势Kromasil®。

1. 机械强度突出，适配制备色谱颗粒刚性强，反复轴向压缩、CIP 碱洗再生不易产生细粉，背压稳定性好，非常适合 DAC 动态轴向压缩柱工业化纯化，也是胰岛素、多肽大规模纯化的经典填料。粒径选择丰富：1.8 μm（UHPLC）、3.5 μm、5 μm（常规分析）、7/10/13/16 μm（制备级），方法可以实现线性放大，分析条件直接平移至制备工艺，减少方法再开发工作量Kromasil®。

2. 表面可控，硅羟基活性稳定硅羟基分布均匀，键合与封尾工艺一致性高，批次间保留时间、分离度波动小，满足药典方法、杂质检查、稳定性考察对重现性的严苛要求；碳载量稳定，Classic 100Å 比表面积约 340 m²/g，保留能力强。

3. 平台化多产品线，差异化选择性不同于单一规格 C18，Kromasil 针对不同痛点做定向改性，解决普通 C18 常见的相塌陷、碱性拖尾、pH 耐受差、极性物质保留弱等痛点。

2 主流 C18 系列产品对比

2.1 Kromasil Classic 100Å C18（标准款）

通用基础型号，封尾十八烷基键合硅胶，是实验室常规 HPLC 主力色谱柱。

• 适用 pH：2–8，短期可耐受至 pH 9.5；

• 适合样品：化药原料药、有关物质、甾体、农残、防腐剂、维生素等中等疏水性小分子；

• 局限：不可长时间 100% 水相运行，纯水条件下会发生疏水塌陷（去润湿 dewetting），保留急剧下降；

• 经典规格：4.6×250 mm，5 μm，货号 M05CLblk，国内药物分析实验室普及率最高。

2.2 Kromasil C18 (w) 水浸润型 C18

专门解决纯水相流动相、极性化合物保留问题，采用极性嵌入封尾改性，是多肽、亲水药物选择型号Kromasil®。

• 核心优势：可长期在 100% 水相条件稳定运行，不会发生相塌陷；

• 选择性：和 Classic C18 存在差异，硅羟基活性更低，对极性物质保留更强；

• 典型场景：胸腺法新、短肽、氨基酸、强极性药物杂质分离；很多多肽纯化工艺直接使用 C18 (w) 上样，降低有机相比例，节约溶剂、提升安全性；

• 粒径：5 μm、10 μm，同时提供分析柱与散装填料。

2.3 Kromasil EternityXT C18 宽 pH 杂化 C18

杂化改性硅胶平台，突破传统硅胶 pH 上限，兼顾硅胶高柱效与高分子填料耐碱优势Kromasil®。

• pH 窗口：1–12，支持高 pH 条件分离碱性药物、胺类化合物，抑制碱性样品拖尾；

• 优势：可使用稀 NaOH 进行 CIP 清洗，适合强吸附碱性样品、复杂中药提取物、碱性 API；柱效显著优于 PS/DVB 聚合物填料，峰形更尖锐、载量更高；

• 规格覆盖：1.8/3.5/5 μm 分析级、10 μm 制备级，同时支持 UHPLC 与工业化纯化。

2.4 Kromasil EternityShell C18 核壳型 C18

2.5 μm 实心核壳颗粒，属于快速分离方案Nouryon。

• pH 稳定区间 1–12；比表面积更低、碳载量 8%，背压低、分离速度快；

• 适用：高通量筛查、快速有关物质检测、环境样品快速分析，适配 UHPLC 系统。

3 典型应用领域

1. 制药行业（API 及有关物质检测、纯化）仿制药一致性评价、药典检测、中间体质控；碱性药物优先选用 EternityXT，中性、弱酸性小分子优先 Classic C18。

2. 多肽与生物活性肽纯化是 Kromasil 标志性应用方向，C18 (w) 在短肽、胰岛素、胸腺肽类纯化方案中大量应用，可反复碱洗 CIP，降低填料更换成本。

3. 食品与环境检测食品添加剂、脂溶性维生素、邻苯二甲酸酯、酚类污染物、农药残留的反相检测。

4. 方法开发 - 放大全流程从 2.1 mm 内径分析柱筛选条件，直接放大到制备柱、工业化 DAC 柱，保留因子、分离度变化可控，减少工艺开发周期。

4 使用、维护与选型要点

4.1 选型速判

• 普通小分子，流动相有机相≥5%，pH 2–8 → Classic C18

• 极性样品、需要 100% 水相、多肽短肽 → C18 (w)

• 碱性样品、需要 pH＞8 运行、频繁碱洗 CIP → EternityXT C18

• 高通量快速检测、低压力快速分离 → EternityShell C18

4.2 色谱柱维护注意事项

1. Classic C18 禁止长时间停泵保存在纯水相中；一旦发生相塌陷，使用 50% 以上有机相冲洗 40 min 左右一般可以恢复；

2. 含 TFA、盐缓冲体系实验结束后，先用高水相冲洗除去缓冲盐，再过渡到甲醇 / 乙腈封存；

3. EternityXT 虽然耐 pH12，但高 pH 高温长期运行依然会缓慢损耗，CIP 清洗完成后及时回调中性；

4. 制备散装填料装填 DAC 柱时，严格控制匀浆溶剂、升压速率，避免颗粒破碎。

5 总结

Kromasil C18 系列凭借稳定球形基质、完整产品线、优异可放大能力，在对批次稳定性、制备放大、CIP 再生有要求的实验室与生产端形成差异化竞争力。Classic C18 作为通用主力，C18 (w) 补齐极性样品短板，EternityXT 解决碱性、宽 pH 痛点，EternityShell 满足快速筛查需求，构成一套覆盖分析到生产的反相色谱解决方案，是药物、多肽纯化领域具性价比的进口 C18 固定相。