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产品简介
TrueBlack 脂褐素自发荧光淬灭试剂TrueBlack Lipofuscin 自溶荧光淬灭剂®这种独特的试剂在免疫荧光染色的组织切片中淬灭脂褐素自发荧光,还能帮助减少来自细胞外基质等其他来源的自发荧光。
| 品牌 | Biotium | 货号 | 23011 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 一个月 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药 |
TrueBlack 脂褐素自发荧光淬灭试剂
TrueBlack 脂富辛自荧光淬灭剂是一种新型试剂,用于灭绝免疫荧光染色组织切片中的脂褐素自发荧光。®
消除脂褐素自发荧光
降低非脂褐素源的自发荧光
不像苏丹黑B那样造成高背景
可在免疫荧光染色前后使用
为人类和老年动物组织的荧光成像铺平了道路
TrueBlack有效消除了脂褐素在人类和小鼠大脑及视网膜等组织中的自发荧光(见图1-3和®TrueBlack的参考资料®).脂萠素由高度自发荧光的氧化蛋白和脂质颗粒组成,这些颗粒在衰老细胞的溶酶体中积累。脂富辛颗粒在所有用于荧光显微镜的通道中都发出明亮荧光,并随着年龄增长在多种细胞和组织类型中积累。因此,除非采用抑制或掩盖脂褐素荧光的方法,否则在某些成人组织或老年动物组织中成像特异性免疫荧光信号几乎不可能。
注: TrueBlack Lipofuscin 自发荧光淬灭剂,20X DMF(目录)编号23007)是最初的表述。TrueBlack Lipofuscin 自消光剂,30倍 DMSO(目录)编号23011)是一种更新、更浓缩的DMSO配方,其毒性比DMF低。淬火器的原料配方不会影响染色性能。®®
传统上,苏丹黑B被用于灭灭脂褐素自溶,方法是在免疫荧光染色后与染料一起培养组织切片。然而,虽然它掩盖了脂褐素的自发荧光,苏丹黑B还在红道和远红通道引入了均匀的非特异性背景荧光(见图1),限制了这些波长荧光染料的使用。现在Biotium开发了TrueBlack作为Sudan黑B的优良替代品。TrueBlack能淬灭脂褐素荧光,但红光/远红背景荧光的增加幅度远小(见图1)。TrueBlack治疗可以在免疫染色之前或之后进行。它快速、简单,对荧光抗体或核染色剂信号的影响极小,从而保持免疫染色的信噪比(见图2-3)。®®®
TrueBlack还可以减少来自其他来源的自发荧光,如胶原蛋白、弹性蛋白、红细胞以及一般背景荧光。它在抑制这些自发荧光源方面不如脂褐素有效,但可以改善人类和非人类组织类型的背景(见图4-5)。TrueBlack还被用于消灭聚碳酸酯滤镜上的背景荧光,这些滤片用作成像细胞学的细胞支撑。®®
TrueBlack Lipofuscin 自消光剂属于我们 TrueBlack 系列的背景还原剂,用于荧光应用,包括®®TrueBlack WB 阻挡缓冲套件®用于西部墨迹,以及TrueBlack 间隔性背景抑制系统(渗透)®用于阻断非特异性免疫荧光染色。还请参阅我们其他用于免疫荧光染色及其他应用的辅助产品。
生物体也已发展TrueBlack Plus®(目录号23014),一款下一代脂褐素淬灭器,其远红背景比原版TrueBlack(目录号23007)更低。TrueBlack Plus也是一种可以在水溶液缓冲液中使用,取代70%乙醇醇的脂褐素淬火剂,使厚组织样本的培养周期更长且不会收缩。®®
TrueBlack 用比 Sudan Black B 更少背景的净化脂褐素®

图1。甲醇固定成人脑切片中的脂富辛自体荧光。在未处理的组织(上排)中,脂褐素以荧光颗粒的形式出现,在所有荧光通道中发荧光。苏丹黑B(中排)掩盖了脂褐素自发荧光,但在红色和远红通道引入了背景。TrueBlack(下排)遮蔽脂褐素,荧光背景增加极小(下排)。根据产品方案,成人大脑皮层的甲醇固定冷冻切割未处理或用0.1%苏丹黑B(70%乙醇)或1倍真黑染色。样品在蔡司LSM 700共焦显微镜上以相同增益设置拍摄,分别在FITC(绿色)、Cy3(红色)和Cy5(远红)通道。®®®®
TrueBlack治疗可以在免疫荧光染色之前或之后进行®

图2。在免疫荧光染色前,使用TrueBlack预处理的脂褐素自溶性消灭。固定甲醛的人类皮层冷冻切割未处理(A)或用TrueBlack处理(B),然后用CF488A抗NeuN抗体结合物(绿色)和DAPI(蓝色)染色。切片在蔡司LSM700共焦显微镜上对所有通道进行了成像。A. 脂富辛在所有通道中荧光明亮,在未处理组织合并图像中呈现为白色斑点(红色箭头)。B. TrueBlack预处理消除了脂褐素自发荧光,对特定染色几乎无影响。®®®®

图3。免疫荧光染色后使用TrueBlack淬灭脂褐素自发荧光。对人类大脑皮层进行甲醇固定冷冻切割,先用兔子抗GFAP染色,随后使用CF640R山羊抗兔药(编号20176)和DAPI(编号40009)。部分部分未处理或用TrueBlack处理,然后安装在EverBrite装裱介质(编号23001)。未处理切片(左侧)显示脂褐素自体荧光(白色箭头),以及GFAP免疫荧光(胶质突,品红)和DAPI染色(核,蓝色)。TrueBlack(右)消除了脂褐素荧光,同时保持了良好的信噪比,用于远红通道(品红)和核反染(蓝色)。®®®®
TrueBlack可以减少除脂褐素以外的自体荧光®

图4。TrueBlack在FITC通道、Cy3和Cy5通道中降低了非脂褐素自发荧光。人体肾脏冷冻切割被固定在冰冷的甲醇中,细胞核则用DAPI(蓝色)染色。自荧光在蔡司LSM 700共聚焦显微镜上以相同成像设置拍摄。上面板:未处理;底板:TrueBlack处理。®®®®

图5。TrueBlack能降低大鼠肾组织切片中FITC通道中的非脂褐素自发荧光。大鼠肾脏冷冻切割置于甲醛中,未处理(A)或用TrueBlack处理(B)。细胞核用DAPI(蓝色)染色。FITC通道(绿色)的自发荧光在蔡司LSM700共聚焦显微镜上,使用相同的成像设置对每个样品进行成像。®®
TrueBlack 脂褐素自发荧光淬灭试剂
上海宝叶生物科技有限公司
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