神谷生物医药公司由神谷浩司于1983年3月创立。 1996年迁至华盛顿州西雅图。我们公司的宗旨是提供 生命科学和医学社区，拥有创新的实验室研究和最高质量的诊断工具。神谷是一家独立的美国公司，服务于全球市场。
该公司的产品是蛋白激酶抑制剂、葡萄素及其类似物K252a。 Staurosporine由2015年诺贝尔奖得主大村聪博士于1977年发现。这是第一次 市面上有Staurosporine。如今，斯陶罗斯波林已成为生活中受欢迎的研究工具之一 科学研究领域。
如今，KAMIYA的生命科学产品线涵盖数千种人类和 动物生物标志物检测用于临床前测试，拥有大型的ELISA试剂盒之一。神谷继续提供多种生命科学研究产品 包括酶抑制剂以及用于多个领域的单克隆/多克隆抗体，包括 细胞凋亡、多重药物耐药性、氧化/DNA损伤与修复、骨骼生物学、癌症、心脏健康， 炎症、压力、肥胖和糖尿病。
1997
年，神谷引入了完整的临床诊断与研究线 用于脂质评估、凝血、炎症、糖尿病、营养评估等的免疫分析产品 基于免疫阴测二度技术的血清蛋白测量。K-ASSAY试剂是为标准化学分析仪开发的，无需混合、溶解或稀释 试剂或样品的异常值。
kamiyabiomedical Cardiac Troponin I ELISA, Rat Plasma
心肌肌钙蛋白 I（CTNI）是调节肌肉收缩的肌钙蛋白复合物组成成分。心肌发生损伤后，CTNI 会释放至血液中。由于其仅特异性表达于心脏组织，因此是诊断心肌损伤的优质生物标志物。人体心肌受损后，CTNI 水平在 12 至 24 小时达到峰值，并在 2 至 6 天内回落至基础值；小鼠体内该指标 1 小时即可达峰，1 至 3 天内恢复正常水平。
本检测试剂盒适用于血浆样本检测。本酶联免疫吸附试验（ELISA）采用两种不同抗体，二者均可识别 CTNI 上一段不易被蛋白酶降解的抗原表位。第一种抗体固定于固相载体（微孔板孔），第二种抗体偶联辣根过氧化物酶（HRP），用于信号检测。首先使用三倍体积的血浆稀释液稀释血浆样本；随后将校准品与稀释后的样本加入微孔板孔，与辣根过氧化物酶偶联抗体共同孵育 1 小时，使 CTNI 分子被固定抗体与检测抗体夹心捕获。洗板去除未结合的辣根过氧化物酶偶联物后，加入四甲基联（TMB）避光孵育 20 分钟。若样本中存在 CTNI，体系会显现蓝色；加入终止液终止显色反应后溶液转为黄色，使用酶标仪在 450 纳米波长下测定吸光度。CTNI 浓度与吸光度值呈正比，通过标准曲线计算得出样本浓度。
抗 CTNI 包被板（12 条 ×8 孔板条）
CTNI 标准品储备液
校准品稀释液，25 毫升
血浆稀释液，25 毫升
辣根过氧化物酶偶联液，11 毫升
20 倍浓缩洗涤液，50 毫升
四甲基联显色液（TMB），11 毫升
终止液，11 毫升
移液枪及配套吸头
蒸馏水或去离子水
聚丙烯试管或玻璃试管
涡旋混匀仪
吸水纸
微孔板振荡孵育仪
洗板机
可检测 450 纳米吸光度的酶标仪
曲线拟合分析软件
冻干标准品储备液需在 - 20℃及以下温度保存；试剂盒其余组分 4℃冷藏；微孔板需密封于含干燥剂的包装袋内。试剂盒在有效期内性能稳定。
所有试剂使用前需恢复至室温。
冻干校准品复溶解冻后，校准品稀释液中可能出现沉淀，需将稀释液置于台式离心机，约 3000 转 / 分钟离心 5 分钟，取澄清上清液使用。
完整理解本说明书并严格遵循标准实验室操作规范开展检测，方可获得稳定、可重复的实验结果。
洗板步骤至关重要。洗涤不充分会导致检测精密度下降、吸光度检测值假性偏高。
环境温度会影响吸光度读数。本 ELISA 试剂盒校准条件为振荡孵育仪转速 150 转 / 分钟、温度 25℃；若检测环境温度偏低，测得吸光度数值会相应降低。
试剂盒提供 20 倍浓缩洗涤液。使用前，将整瓶 50 毫升浓缩洗涤液加入 950 毫升蒸馏水或去离子水中混匀，配制成 1 倍工作洗涤液。
取 200 微升去离子水或蒸馏水复溶冻干 CTNI 标准品储备液，轻柔混匀至溶解。
标记 7 支聚丙烯试管，对应浓度分别为 10、5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156 纳克 / 毫升。
向标注 10 纳克 / 毫升的试管中加入 443.1 微升校准品稀释液，再添加 56.9 微升复溶后的标准品储备液，轻柔混匀，得到 10 纳克 / 毫升校准品工作液。
向标注 5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156 纳克 / 毫升的试管中各加入 0.25 毫升校准品稀释液。
配制 5 纳克 / 毫升校准品：取 0.25 毫升 10 纳克 / 毫升校准品，加入装有 0.25 毫升稀释液的对应试管中混匀；剩余梯度校准品采用二倍连续稀释法依次配制。
复溶后的 CTNI 标准品储备液使用后需立即冷冻保存：-20℃条件下可稳定存放至少 1 个月，-70℃可稳定保存 6 个月；各梯度校准品工作液使用后直接丢弃，不可重复利用。
血液采集后需尽快制备血浆（抗凝剂可选乙二胺四乙酸、柠檬酸盐或肝素），制备完成后 4℃暂存。所有样本处理条件需保持统一（储存时长、储存温度一致）。若采血后 4 小时内无法完成检测，血浆样本需置于 - 70℃冷冻，且仅可解冻一次后使用。建议所有样本设置复孔检测。检测前需用血浆稀释液将血浆样本四倍稀释：在聚丙烯微量离心管中，取 100 微升血浆样本，加入 300 微升血浆稀释液充分混匀即可。
根据实验所需孔数取出对应数量的 8 孔板条固定于板架；未使用的板条放回含干燥剂的密封袋，4℃保存备用。
每孔加入 100 微升辣根过氧化物酶偶联液。
向各孔分别添加 100 微升梯度校准品或稀释后样本（校准品与样本均建议设置复孔）。
置于微孔板振荡孵育仪，150 转 / 分钟、25℃条件下孵育 1 小时。
弃去孔内液体，使用洗板机加入 1 倍洗涤液洗板 5 次，每孔洗涤液体积 400 微升。
将微孔板倒扣在吸水纸上用力拍打，去除孔内全部残留液滴。
每孔加入 100 微升四甲基联显色液（TMB）。
置于轨道式微孔板振荡器，150 转 / 分钟、25℃避光孵育 20 分钟。
孵育 20 分钟后，每孔加入 100 微升终止液终止显色反应。
轻柔混匀体系，确保所有蓝色转变为黄色。
5 分钟内使用酶标仪读取 450 纳米波长下的吸光度值。
采用曲线拟合软件，以各梯度校准品吸光度值为纵坐标、浓度常用对数值（log₁₀）为横坐标，绘制标准曲线。
使用四参数逻辑回归（4PL）模型拟合标准曲线（X 轴为浓度 log₁₀值），代入样本吸光度数值反算对应浓度（取反对数得到稀释后浓度）。
将计算得到的稀释后浓度乘以稀释倍数，得到原始血浆样本中的实际 CTNI 浓度。
若样本 450 纳米吸光度值超出标准曲线线性范围，需将样本适当稀释后重新检测；如需进一步稀释，先取新鲜解冻血浆样本，以三倍体积血浆稀释液四倍稀释，再使用校准品稀释液进行二次稀释。
下文仅为标准曲线示意图，仅作参考；每组实验均需同步配制梯度校准品，单独绘制专属标准曲线。
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上海宝叶生物科技有限公司
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