EtOH-NH-Agarose 试剂

EtOH-NH-Agarose 试剂

核心技术参数

1. 基质骨架：4% 高度交联琼脂糖微球，球形颗粒 50–150 μm

2. 封闭配体：乙醇胺（2 - 氨基乙醇）共价封闭环氧活化位点，无环核苷酸、无亲和结合位点

3. 氨基密度：低密惰性氨基（仅封闭残留活化基团，无特异性吸附位点）

4. 排阻极限：约 30 MDa，兼容激酶、磷酸二酯酶、调控蛋白、抗体等大分子

5. 供货形态：50% 乙醇 - 水溶液混悬浆，防止填料霉变

6. pH 稳定区间：工作 pH 4.0–9.0；短时耐受 pH 2–11 酸碱洗涤

7. 储存条件：2–8℃避光，严禁冷冻；原装未开封有效期 36 个月

8. 无酶质控：无 DNase/RNase/ 蛋白酶污染，适配微量细胞裂解液、龈沟液、菌群上清样本

EtOH-NH-Agarose 试剂

化学结构与作用原理

1. 基质制备工艺

   琼脂糖经环氧氯丙烷活化后，全部活性环氧位点与乙醇胺（EtOH-NH₂）发生开环反应封闭，消除可结合蛋白的活化位点；仅保留中性亲水乙醇胺短臂，无特异性结合基团。

2. 实验核心功能：阴性对照基质

   BIOLOG 配套系列 2′-AHC-c-di-AMP、cCMP、cAMP 亲和凝胶均为环氧琼脂糖偶联环核苷酸配体；EtOH-NH-Agarose 是同骨架空白对照，用于扣除蛋白非特异性吸附：

• 区分蛋白是特异性结合环核苷酸配体，还是单纯吸附琼脂糖骨架 / 氨基基团；

• 排除裂解液中杂蛋白、核酸、脂质的非特异结合干扰，降低 pull-down 假阳性。

3. 低非特异吸附优势

   乙醇胺为短链中性亲水结构，相比普通氨基琼脂糖，对激酶、免疫蛋白、菌群蛋白疏水吸附极低，微量样本背景干净。

上海宝叶生物科技有限公司

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