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Recombinant human BACE1 试剂

产品简介

Recombinant human BACE1 试剂
重组人类BACE1(UniProt P56817)在HEK293细胞中表达。适用于酶活性分析、抑制剂IC50测定、底物切割研究及抗体验证实验。

更新时间:2026-10-19
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品牌其他品牌货号REC-BACE1
供货周期一个月应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

Recombinant human BACE1 试剂

重组人类BACE1(UniProt P56817)在HEK293细胞中表达。适用于酶活性分析、抑制剂IC50测定、底物切割研究及抗体验证实验。


目标概述

BACE1(β-分泌酶1;UniProt P56817)是一种I型跨膜天冬氨酸蛋白酶,由501个氨基酸组成。它是促成淀粉样前体蛋白(APP)在β分泌酶位点——APP的671至672残基之间——最初蛋白水解切割的节速酶,产生可溶的APP-β(sAPPβ)和膜保留的C端片段(C99),随后被γ分泌酶处理释放Aβ肽。BACE1主要表达在细胞膜上,并在神经元组织中表现出最高的丰度。 该重组体在HEK293哺乳动物细胞中产生,保持了与人类天然酶相关的糖基化结构和折叠环境。哺乳动物细胞表达对于该类天冬氨酸蛋白酶尤为重要,因为正确的二硫键和N-连接糖基化影响催化活性和抑制剂结合几何。 研究人员利用该重组蛋白进行荧光基或FRET底物切割分析,测量BACE1蛋白水解活性并生成候选小分子或肽抑制剂的IC50值。定义的重组格式在抑制剂筛选活动中提供了一致的酶源,消除了组织衍生制剂的变异性。它还作为Western blot和基于ELISA抗体验证实验中的阳性对照抗原。需要匹配抗体试剂用于验证流程的研究人员,可以将该重组抗体与Triple Point Biologics的抗BACE1抗体(SKU:RPBACE1)配对,后者已验证用于针对人类BACE1的Western blot。

背景

BACE1(β位点APP 切割酶1;EC 3.4.23.46)是一种膜锚定的天冬氨酸内蛋白酶,作为神经元的主要β分泌酶。其在β位点对APP的切割是淀粉样蛋白生成处理途径中的明确步骤,所得的C99片段是随后γ分泌酶切割后Aβ40和Aβ42肽的直接前体。正因为这种守门人角色,BACE1作为阿尔茨海默病病理学的研究靶点被广泛研究,并且它仍是神经科学文献中最为特征化的天冬氨酸蛋白酶之一。 在已发表的研究中,重组BACE1已被用于分析多种化学支架上的候选抑制剂。Foudah等人(2026)采用计算和酶学方法评估含有亚氨基苯二醇样支架的海洋真菌代谢物作为候选BACE1抑制剂,展示了重组酶制剂如何支撑早期命中识别中的结构-活性关系(SAR)研究。另外,多靶点QSAR基准研究(Alshehade等,2026)将BACE1活性数据集纳入标准基准,反映该蛋白作为机器学习辅助药物发现工作流程中参考酶的广泛应用。 除了直接抑制剂筛选外,BACE1还在细胞和动物模型中Aβ生成机制性研究中发挥重要作用。Wang 等人(2026)在啮齿动物认知障碍模型中考察了 BACE1 蛋白水平和切割活性,以评估饮食和血管损伤对淀粉酸酶促反应的影响——该研究设计中重组 BACE1 作为活性参考标准,并在组织裂解液实验中进行抗体验证。同样,对γ分泌酶调节因子的研究(Lindemann 等,2026)部分通过化合物与BACE1生成底物的上游关系来表征化合物,即使用经过充分表征的重组BACE1制剂生成定义的C99底物库。 BACE1还切割了APP以外的底物,包括神经细胞粘附分子CHL1,使其在轴突引导和髓鞘形成等更广泛的研究环境中出现。该酶的活性位点结构——具有大而开放的基底结合裂隙的双膜透体蛋白酶折叠——使其适合结构生物学方法,包括X射线晶体学和低温电子显微镜,在哺乳动物系统中产生的重组制剂提供了足够纯度和构象均质性的材料。Triple Point Biologics自1994年以来一直支持蛋白酶和抑制剂研究试剂,这款HEK293表达的BACE1旨在满足生化和无细胞筛选格式的重复性要求。

应用

  • 基于荧光或FRET的BACE1酶活性测定法,使用APP衍生肽底物

  • 针对BACE1活性位点的小分子、肽或天然产物支架的抑制剂IC50测定

  • 候选β分泌酶抑制剂系列的结构-活性关系(SAR)分析

  • 利用定义的重组BACE1活性测量生成多靶点QSAR数据集

  • 抗BACE1抗体(与TPB抗体RPBACE1配对)用于Western blot验证的正对照抗原

  • ELISA标准或捕获抗原用于生物样本中BACE1的定量

  • 底物生成:生产定义的C99 APP片段池,用于下游γ分泌酶检测

  • 通过SPR、ITC或差分扫描荧光法对BACE1抑制剂结合的生物物理特性


Recombinant human BACE1 试剂 规格

  • 表达系统

  • HEK293

  • 序列(AA范围)

  • 氨基酸46–460(外质域,催化区)

  • 分子量

  • ~52 kDa

  • 亚细胞定位

  • I型跨膜蛋白;高尔基体体→细胞表面→内体

  • 纯洁性

  • >90% 由SDS-PAGE提供

  • 内毒素水平

  • <0.1 EU/μg,由LAL

  • 具体活动

  • 针对荧光APP肽底物的活性催β分泌酶

  • 存储缓冲区

  • 50 mM 三盐酸盐 pH 7.5,150 mM NaCl,10% 甘油

  • 存储

  • 分额并储存于-20°C;避免反复冻融



上海宝叶生物科技有限公司

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