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HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1

产品简介

HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1151) Detection Kit, 10,000 Assay Points
HTRF 磷酸化胰岛素受体 β(Tyr1150/1151) 检测试剂盒 10000 次

更新时间:2026-09-17
浏览次数:815
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品牌Revvity / 瑞孚迪货号63ADK016PEH
供货周期一个月应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1151) Detection Kit, 10,000 Assay Points

产品概述

磷酸化胰岛素受体 β(Tyr1150/1151)检测试剂盒可检测胰岛素受体 β 上 Tyr1150/1151 位点的磷酸化。胰岛素受体受胰岛素及胰岛素样生长因子激活,参与多条信号通路,例如胰岛素信号通路与 FoxO 信号通路。
均相时间分辨荧光(HTRF)检测技术相比其他技术具备多项优势:・均相即加即读模式・无需洗涤步骤・低背景信号・可简便地从 96 孔或 384 孔微孔板小型化转换至高密度检测体系,如 384 孔低容量板与 1536 孔板・信号稳定,读取时间与检测规模选择灵活


工作原理

磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)检测原理磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)检测用于测定在L-Tyrosine1150/1151 位点发生磷酸化的胰岛素受体 β。与蛋白质免疫印迹法不同,该检测全程基于微孔板开展,无需凝胶、电泳或转膜操作。磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)检测使用 2 种标记抗体:一种带有供体荧光基团,另一种带有受体荧光基团。第一种抗体可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序;第二种抗体能够识别该蛋白,且识别作用不受蛋白磷酸化状态影响。当蛋白发生磷酸化时,可形成包含两种标记抗体的免疫复合物,使供体荧光基团与受体荧光基团紧密靠近,进而产生荧光共振能量转移(FRET)信号。该信号强度与样品中磷酸化蛋白的浓度呈正比,可在无洗涤检测体系下评估该蛋白的磷酸化水平。

HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1151) Detection Kit, 10,000 Assay Points

磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151)双板检测方案

本双板方案流程:先在 96 孔板中培养细胞,随后裂解细胞;将细胞裂解液转移至 384 孔低容量检测板,再加入磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151)均相时间分辨荧光检测试剂。该方案可监测细胞活力与细胞汇合度。

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磷酸化胰岛素受体 β(Tyr1150/1151)单块检测板实验方案

可在同一块培养、刺激及裂解用检测板中,借助均相时间分辨荧光(HTRF)试剂完成磷酸化胰岛素受体 β(Tyr1150/1151)的检测,无需洗涤步骤。该高通量筛选专用实验方案支持实验体系微型化,同时保证稳定可靠的均相时间分辨荧光检测效果。

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检测验证

HepG2 细胞磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)检测示意图

将 HepG2 细胞以每孔 100000 个细胞接种于 96 孔板。在 37℃、5% 二氧化碳条件下孵育过夜后,向细胞中加入梯度稀释的胰岛素,于 37℃、5% 二氧化碳环境下刺激 5 分钟。吸去细胞刺激液,向细胞内加入 50 微升裂解缓冲液,轻柔震荡 30 分钟完成细胞裂解。取 16 微升样品转移至 384 孔小体积板中,再加入 4 微升磷酸化胰岛素受体 β 均相时间分辨荧光检测试剂,过夜采集信号。

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HepaRG 细胞中磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)检测说明

将 HepaRG 细胞以每孔 200000 个细胞接种于 96 孔板。在 37℃、5% 二氧化碳条件下孵育 5 天后,向细胞中加入系列稀释的胰岛素,同时添加终浓度 30 微摩尔的过钒酸钠,于 37℃、5% 二氧化碳环境下刺激 5 分钟。移除细胞刺激培养液,向细胞内加入 50 微升裂解缓冲液,轻柔振荡 30 分钟完成细胞裂解。取 16 微升样品转移至 384 孔小体积反应板中,再加入 4 微升磷酸化胰岛素受体 β 均相时间分辨荧光检测试剂。同时另取 16 微升样品加入其他孔中,并添加 4 微升总胰岛素受体 β 均相时间分辨荧光检测试剂。信号过夜采集。

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磷酸化胰岛素受体 β(L-Tyrosine 1150/1151 位点)蛋白免疫印迹对比实验

人源 HEK293 细胞培养至汇合度 80%。经胰岛素与过钒酸钠共同处理后,裂解细胞,通过离心收集可溶性上清液。对细胞裂解液进行梯度稀释,取各稀释度样品 16 微升加入 384 孔低容量白色微孔板,最后加入磷酸化胰岛素受体 β 均相时间分辨荧光(HTRF)细胞检测试剂盒试剂。平行对比结果显示,该均相时间分辨荧光磷酸化检测方法的灵敏度比蛋白免疫印迹法(WB)至少高 8 倍。

HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1151) Detection Kit, 10,000 Assay Points


HTRF Phospho-IR-β (Insulin Receptor β) (Tyr1150 /1151) Detection Kit, 10,000 Assay Points

应用
Cell Signaling
自动化兼容
Yes
品牌
HTRF
细胞或信号通路
MAPK / ERK signaling
检测方式
HTRF
分子修饰
Phosphorylation
产品组别
Kit
样本体积
16 µL
运输条件
Shipped in Dry Ice
靶点
IR-β (Insulin Receptor β)
靶点类别
Phosphoproteins
技术平台
TR-FRET
疗法领域
Metabolism/Diabetes
Neuroscience
单位大小
10,000 assay points





上海宝叶生物科技有限公司

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