UBPBIO Nedd8 Conjugation Kit 试剂盒

UBPBIO Nedd8 Conjugation Kit 试剂盒

Nedd8 结合试剂盒旨在体外检测 Nedd8 与蛋白质底物的结合情况。在蛋白质的Neddyl化反应中，Nedd8首先被Nedd8活化酶APPBP1/UBA3（E1）以ATP水解依赖的方式激活;活化后的Nedd8随后通过与UbcH12I催化L-Cysteine残基形成硫醇键，转移到Nedd8的共轭酶Ube2M（UbcH12）（E2）;带电的Nedd8 Ube2M（UbcH12）可以在适当的Nedd8连接酶（E3）存在的情况下介导蛋白质的Neddyl化。

描述

Nedd8 结合试剂盒旨在体外检测 Nedd8 与蛋白质底物的结合情况。在蛋白质的Neddyl化反应中，Nedd8首先被Nedd8活化酶APPBP1/UBA3（E1）以ATP水解依赖的方式激活;活化后的Nedd8随后通过与UbcH12I催化L-Cysteine残基形成硫醇键，转移到Nedd8的共轭酶Ube2M（UbcH12）（E2）;带电的Nedd8 Ube2M（UbcH12）可以在适当的Nedd8连接酶（E3）存在的情况下介导蛋白质的Neddyl化。

典型的20微升反应在Neddylation缓冲液中含有100 nM APPBP1/6xHis-UBAs、2 μM 6xHis-Ube2M（UbcH12）、15 μM 6xHis-Nedd8、4 mM ATP、2 μM E3（未提供）和2 μM蛋白底物（未提供）。

UBPBIO Nedd8 Conjugation Kit 试剂盒 组成部分

• 20个APPBP1/6xHis-UBA3（2微米）................25微升
• 20X 6xHis-Ube2M（UbcH12）（40微米）..........25微升
• 10X 6xHis-Nedd8（150微米）..........................50微升
• 10X ATP（40 mM）........................................60微升
• 10倍奈基化缓冲液...............................100微升

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