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hTERT Cell Immortalization Kit 试剂盒

产品简介

hTERT Cell Immortalization Kit 试剂盒
1. 101Bio 568-hTERT hTERT 细胞永生化试剂盒
2. 101Bio hTERT 慢病毒永生化试剂盒

更新时间:2026-09-11
浏览次数:2334
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品牌其他品牌货号hTERT
供货周期一个月应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

hTERT Cell Immortalization Kit 试剂盒

产品名称:hTERT 细胞永生化试剂盒简介:货号:hTERT
原代细胞在培养过程中仅能进行预定且有限次数的细胞分裂。在有限的群体倍增之后(倍增次数因物种、细胞类型以及培养条件而异),原代细胞会进入一种被称为复制性衰老的状态,不再继续分裂。为克服衰老,现有多种方法可实现体外培养哺乳动物细胞的永生化。目前最新发现的细胞永生化手段是表达端粒酶逆转录酶(TERT)。该方法对端粒长度敏感的细胞尤为适用,其中包含多种人类细胞。该蛋白在绝大多数体细胞中通常处于沉默状态。外源导入 hTERT 后,这类细胞可通过维持足够的端粒长度,从而规避复制性衰老。但在部分细胞类型(尤其是上皮细胞)中,hTERT 的过表达无法诱导细胞永生化。
规格:5 支 × 20 微升运输条件:干冰运输,-80℃保存(有效期可达 6 个月)
质量控制:包装的慢病毒载体为冷冻型 VSV-G 假型病毒颗粒。慢病毒滴度采用宝日医(Clontech)Lenti-X qRT-PCR 滴度检测试剂盒(货号:631235)测定。每批次细胞永生化试剂盒均在成纤维细胞中完成功能性验证。
安全注意事项:强烈建议操作冷冻冻管时,全程佩戴防护手套、实验服以及全脸面罩。需注意:冻管浸入液氮时,液氮可能渗入管内。冻管解冻时,液氮会气化,使管内压力急剧升高,可能造成冻管爆裂,或管盖以危险力道弹出。本试剂盒仅供科研使用,不可用于诊断或治疗操作。


hTERT Cell Immortalization Kit 试剂盒实验方案

  1. 将靶细胞接种于 6 孔板的单个孔内,接种密度为每孔 1~2×10⁵个细胞。

  2. 次日,从 - 80℃冰箱取出一管浓缩重组慢病毒,置于冰上解冻。

  3. 向 6 孔板内的靶细胞加入 4~20 微升 / 孔病毒上清液,同时添加 4 微升转导增强试剂(101Bio,货号:PV500)。该试剂属于聚阳离子,可中和电荷相互作用,增强假病毒衣壳与细胞膜的结合能力。

  4. 次日,吸除含有的病毒上清的培养基,向细胞更换合适的培养基,置于 37℃条件下培养。

  5. 培养 72 小时后,将细胞传代至 2 个 100 毫米培养皿,加入适量嘌呤霉素用于稳定细胞株构建。

  6. 筛选 10~15 天后,挑取单克隆进行扩增,并筛选阳性克隆。备注:病毒滴度会大幅下降,若需要将解冻后的病毒上清再次冷冻保存以备后续使用,建议向其中加入体积占比 25% 的病毒保护培养基(101Bio,货号:PV500)。







上海宝叶生物科技有限公司

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