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Product Centerepochlifescience:CloneRanger 拓扑异构酶试剂盒:CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning Kit
品牌 | 其他品牌 | 货号 | C5866 |
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供货周期 | 一个月 |
epochlifescience:CloneRanger 拓扑异构酶试剂盒
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning Kit专为同等效率地克隆两个平端片段而设计
零背景全拓扑异构酶克隆试剂盒利用痘苗病毒拓扑异构酶 I 的 DNA 链转移活性,快速克隆长达 10 kb 的 DNA 片段。痘苗病毒 DNA 拓扑异构酶 I 与含有 5' CCCTT↓ 切割识别基序的质粒载体形成 3'-磷酰基中间体。然后,共价结合的拓扑异构酶 I 将切割的载体 DNA 链转移到带有游离 5'-OH 末端的待克隆 DNA 片段(参见下图)。该转移反应快速且可重复。该试剂盒中包含的克隆载体 pCloneEZ-Omni-Amp/HC 和 pCloneEZ-Omni-Kan/HC 是经过改造的高拷贝数质粒,可耐受轻度毒性基因。可快速克隆剧毒基因。
不包括感受态细胞。
零背景:> 90% 的随机挑选的克隆包含正确的插入片段。
快速:PCR片段与载体混合后立即转化,无需孵育。
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning 试剂盒流程图:
套件尺寸 | ||
成分 | C5865-25/C5866-25(25 次反应) | C5865-50/C5866-50(50 次反应) |
pCloneEZ-Omni-Amp/HC 或 pCloneEZ-Omni-Kan/HC (20 ng/μl) | 25微升 | 50 微升 |
10X 增强剂 | 30 微升 | 60 微升 |
对照插入物 lacZα (20ng/μl) | 10微升 | 10微升 |
空白对照载体 (100ng/μl) | 20 微升 | 20 微升 |
M13F 测序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
M13R 测序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
上海宝叶生物科技有限公司
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