TransIT-VirusGEN Transfection Reagent – 1.5 mL

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent – 1.5 mL

描述

TransIT-VirusGEN®转染试剂旨在增强包装和质粒向粘附和悬浮HEK 293细胞类型的递送，以增加重组腺相关病毒（AAV）和瘦病毒的产生。

TransIT-VirusGEN®转染试剂的主要优势包括：

• 性能——高效DNA递送以生产高滴度病毒载体

• 可扩展性——从<1毫升到大规模培养的高效生产

• 灵活性——兼容不同的重组病毒和细胞培养系统

• 无动物来源——全合成转染试剂配方

数据

TransIT-VirusGEN®在悬浮剂和粘附AAV细胞培养中优于竞争对手试剂。 在FreeStyle™ F17培养基（A）或相邻的293T/17细胞（B）中培养的Suspension FreeStyle™ 293-F细胞，转染pAAV-hrGFP、pAAV-RC和pAAV-Helper（1：1：1比例，1.5 μg/ml，Agilent Technologies），试剂包括TransIT-VirusGEN®（2：1，体积：重量）、Competitor B4（3：1）、Competitor B5（3：3：1）或25 kDa PEI（4：1，PolySciences）。采集的病毒用于转导HT1080细胞，并在转导后48小时使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪测量GFP表达。对GFP阳性细胞低于20%的病毒稀释量进行了功能滴度测量。误差条表示三倍井的标准差。

TransIT-VirusGEN®在悬浮剂和粘附型慢病毒细胞培养中优于竞争对手试剂。在FreeStyle™ F17培养基（A）或粘附的293T/17细胞（B）中培养的FreeStyle™ 293-F悬浮细胞，用pLKO.1-puro-CMV-TurboGFP™转移载体和由MISSION®（1：1比，1 μg/ml）驱动的慢病毒包装混合物，与以下试剂进行转染：TransIT-VirusGEN®（3：1，体积：重量）、竞争者B4（2：1（A）或3：1（B））、竞争者B5（2：2：1（A）或3：3：1（B））或25 kDa PEI（4：1， 多科学）。采集上清液，过滤（0.45微米），并用293T/17细胞滴定。在8 μg/ml的TransduceIT™存在下进行慢病毒转导，转导后72小时使用guava easyCyte™ 5HT流式细胞仪测量GFP表达。对GFP阳性细胞低于20%的病毒稀释量进行了功能滴度测量。误差条表示三倍井的标准差。

TransIT-VirusGEN® 实现了广泛的可扩展性（AAV）。在FreeStyle™ F17培养基（A）或粘附的293T/17细胞（B）中培养的悬浮FreeStyle™ 293-F细胞，使用TransIT-VirusGEN®转染试剂（试剂与DNA比2：1，体积：重量，Mirus），在指定体积的培养槽下转染pAAV-hrGFP、pAAV-RC和pAAV-Helper（1：1：1比例，总1.5 μg/ml，Agilent Technologies）。采集的病毒用于转导HT1080细胞，并通过流式细胞术测量转导后48小时的GFP表达。对GFP阳性细胞低于20%的病毒稀释量进行了功能滴度测量。误差条表示三重水井、烧瓶或碟的标准差。

trans IT-VirusGEN®相比PEI在慢病毒生成中实现更高的转染效率。 HEK293T/17细胞被转染为慢病毒包装质粒，并（a）控制RFP转移质粒或（b）使用TransIT-VirusGEN®转染试剂（3：1试剂与DNA比;体积：重量）或25 kDa线性PEI（3：1试剂与DNA比;重量：重量）靶向SPdCas9-RFP转移质粒。明场和RFP图像是在转染后17-22小时拍摄的。

TransIT-VirusGEN Transfection Reagent – 1.5 mL

上海宝叶生物科技有限公司

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