G-Biosciences ANB-NOS (N-5-Azido-2-nitrobenzoyloxy

G-Biosciences ANB-NOS (N-5-Azido-2-nitrobenzoyloxysuccinimide)

两步交联反应原理

第一步（避光共价偶联，pH 6.5–8.5）

NHS 酯温和与蛋白、多肽、抗体上伯氨基（Lys 侧链、N 端氨基） 形成稳定酰胺键，完成探针预标记；全程避光，避免叠氮提前分解。

第二步（紫外光诱导非特异性交联）

320–350 nm 紫外照射下，硝基叠氮基团释放氮气生成高活性氮宾自由基，快速与邻近任意氨基酸、核酸、脂质发生共价交联，捕捉瞬时蛋白互作复合物。

核心实验应用场景

蛋白 - 蛋白相互作用光交联

膜蛋白、信号通路复合物、分泌蛋白瞬时互作捕获（经典用于信号识别颗粒 SRP 与新生多肽交联）

胞内原位标记

脂溶性可穿透细胞膜，活细胞内靶向标记胞内蛋白、受体配体复合物

蛋白 - 核酸交联

RNA/DNA 结合蛋白光捕获，降低紫外对核酸的降解损伤

固相载体偶联、纳米材料修饰

氨基修饰二氧化硅、生物材料表面共价接枝生物分子

抗体药物偶联 ADC、免疫探针构建

光控定点偶联，减少蛋白变性

细胞膜结构、细胞表面受体互作研究

G-Biosciences ANB-NOS (N-5-Azido-2-nitrobenzoyloxysuccinimide)

储存、操作与安全规范

1. 储存条件

• 长期保存：-20 ℃，避光、干燥密封，防潮吸潮（吸潮会直接失活）

• 短期使用：2–8 ℃避光，开封后一次性配液，避免反复冻融

2. 操作要点

1. 全程避光操作，配液、孵育阶段遮光；紫外交联步骤单独避光处理

2. 先溶于无水 DMSO/DMF 配母液，再稀释至水相缓冲液；水溶液中 NHS 酯半衰期短，现配现用

3. 紫外交联推荐 302 nm 紫外灯，照射 5–10 min 即可完成交联

3. 安全提示

• 仅科研体外实验使用，禁止临床、体内给药

• 叠氮类试剂避免强酸、重金属，防止生成易爆叠氮化物；操作佩戴手套护目镜

上海宝叶生物科技有限公司

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