Recombinant Pseudomonas aeruginosa UDP-3-O-acyl-N-

Recombinant Pseudomonas aeruginosa UDP-3-O-acyl-N-acetylglucosamine deacetylase

 ECHO 品牌产品核心参数

表达体系

宿主：E. coli 原核表达（BL21/ SoluBL21 高可溶性菌株）

标签：N 端 6×His-SUMO 融合标签，可 SUMO 蛋白酶切除标签，获得天然全长 LpxC

分子量

带 His-SUMO 标签：~49.4 kDa；切除标签天然蛋白：~33.4 kDa

纯度质控

SDS-PAGE 纯度≥85%，批次标配 COA（电泳、酶活、浓度检测报告）

蛋白形态

可溶性纯化蛋白，液体缓冲液体系（20 mM Tris-HCl pH7.5、150 mM NaCl、10% 甘油、微量 Zn²⁺稳定剂）

标准包装规格

20 μg / 50 μg / 100 μg / 1 mg 多梯度分装

酶催化机制与生化特性

核心催化反应（脂 A 合成关键限速步骤）

\(\text + \ce \xrightarrow} \text + \text\)

该步为不可逆限速步骤，是革兰氏阴性菌脂多糖（LPS）生物合成必需通路，无同源人源蛋白，是新型抗耐药菌药物靶点。

金属依赖特性

锌离子（Zn²⁺）金属酰胺酶，活性中心结合 Zn²⁺；EDTA 螯合金属离子会丧失酶活，补加 Zn²⁺可恢复活性。

最适反应条件

• pH：7.0–7.8

• 温度：30–37 ℃

• 必须体系含微量 ZnCl₂（1–10 μM）维持催化活性

核心应用场景（ECHO 该酶主打靶点药物筛选）

抗铜绿假单胞菌抑制剂高通量筛选

多重耐药 PA（医院肺部 / 创面感染）LpxC 小分子抑制剂体外酶活筛选、IC50 测定、构效关系 SAR 研究；区别于大肠杆菌 LpxC，PA-LpxC 底物口袋结构独特，仅用同源 PA 酶才能真实反映体内抑菌效力。

脂 A 合成通路生化机制研究

体外重构 LPS 前体合成通路、底物结合动力学、突变体酶活对比。

X 射线晶体结构 / 分子对接

高可溶性 His-SUMO 融合蛋白，易纯化、易结晶，用于抑制剂共晶结构解析（PDB 数据库 6MAE 为 PA-LpxC - 抑制剂复合物晶体）。

抗菌药物作用机制验证

体外酶抑制实验 + 细菌体内回补实验联用，验证化合物靶点特异性。

Recombinant Pseudomonas aeruginosa UDP-3-O-acyl-N-acetylglucosamine deacetylase

储存、运输与操作规范

储存

长期：-80 ℃避光保存，分装避免反复冻融；短期 1–2 周可 - 20 ℃；禁止 4 ℃长期放置。

运输

干冰冷链运输，收到后立即转移至超低温冰箱。

关键操作要点

• 所有缓冲液添加微量 Zn²⁺，禁用高浓度 EDTA；

• 酶活测试全程冰上操作，反应启动前 37 ℃预温底物；

• SUMO 标签切除：Ulp1/SUMO 蛋白酶 1:50 w/w，4 ℃过夜酶切，Ni 柱去除标签与蛋白酶。

上海宝叶生物科技有限公司

国内试剂耗材经销代理

国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

进出口货物代理服务。

公司代理众多生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。