squarix ME042 试剂

squarix ME042 试剂

squarix ME042 试剂

光谱与理化特性

1）光学性质（在乙醇 / 缓冲液中）

• 最大吸收：λₐₓ ≈ 562 nm（log ε ≈ 4.9）

• 发射峰：λₑₘ ≈ 598 nm

• Stokes 位移：~36 nm

• 荧光量子产率：高（无 Fe²⁺时）；Fe²⁺结合后荧光淬灭（OFF 型）。

2）Fe²⁺结合特性

• 选择性：对 Fe²⁺高度特异，对 Fe³⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Co²⁺等几乎无响应。

• 化学计量：RDA : Fe²⁺ = 3 : 1（mol/mol），形成无荧光复合物。

• 亲和力：Kd 低 μM 级；与同系物 RPA 相比，RDA 对 Fe²⁺亲和力略低，但线粒体靶向性更稳定。

3）线粒体靶向机制

• 定位原理：分子含离域亲脂性阳离子，依赖线粒体膜电位（Δψₘ ≈ −180~−200 mV），主动富集于线粒体基质（富集倍数 > 1000 倍）。

• 共定位：与 MitoTracker Green/Red 共定位率 > 95%；不染色胞质、溶酶体或细胞核。

4）稳定性与储存

• 固体：≤4℃、干燥避光，稳定≥2 年

• 溶液（DMSO/EtOH）：−20℃避光，稳定≥6 个月；避免反复冻融

• 工作液：新鲜配制；含血清培养基中稳定≥4 h。

作用机制（为何能测线粒体 Fe²⁺）

1. 靶向富集：RDA 通过膜电位驱动进入线粒体基质。

2. 特异性结合：基质中 ** 游离 / 可螯合 Fe²⁺** 与 RDA 的 2,2'- 联吡啶基团结合。

3. 荧光淬灭：3 分子 RDA 包围 1 分子 Fe²⁺，发生光诱导电子转移（PET），荧光从亮→暗。

4. 定量依据：荧光强度与线粒体可螯合 Fe²⁺浓度成反比；可通过校准曲线换算浓度。

关键区别：RDA 测的是 “线粒体可螯合铁池（mitochondrial chelatable iron pool）"，不是总铁或蛋白结合铁；这部分铁是氧化应激与铁死亡的核心诱因。

上海宝叶生物科技有限公司

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