biozol Lipid Nanoparticles LP-01 试剂

脂质纳米颗粒

Echelon生物科学，一家脂质公司拥有数十年来之不易的经验。Echelon基于在脂质、脂质信号传导和分子生物学方面的丰富专业知识，不仅擅长化学合成脂质，还理解脂质在生物学环境中的功能。

用于RNA递送的脂质纳米颗粒

多年来，基因疗法已被开发，已有多种基于DNA的治疗获批。然而，这些通常依赖于能够引发免疫反应的病毒载体。基于RNA的疗法提供了一种有前景的替代方案，并且近年来随着mRNA疫苗和RNA药物的成功，这一趋势日益增长。

一个关键挑战是裸RNA无法直接使用，因为它不稳定、免疫原性强且细胞吸收能力差。为此，采用脂质纳米颗粒（LNP）等递送系统。LNP保护RNA免受降解，使其进入细胞，从而产生治疗性蛋白质。有效的治疗依赖于对RNA和LNP配方的精心设计。

设计脂质纳米颗粒（LNPs）需要在效能与免疫反应之间取得平衡。mRNA和所用的可电离脂质都能触发免疫——这对疫苗有用，但对于需要反复给药的治疗（如基因编辑）则存在问题。PEG化脂质延长循环时间，但能诱导抗PEG抗体，从而加快清除速度。正在探索诸如聚沙哆嗪等替代方案，以减少这一问题，同时不影响效率。另一个挑战是靶向递送：疫苗通过系统分发受益，而其他疗法则需要针对细胞特异性靶向。策略包括修饰LNP表面电荷，或添加靶向肽或抗体，将其导向目标组织。

RNA合成

LNPs中使用的大多数RNA是通过体外转录（IVT）制备的，这是一种灵活的方法，使用不同的RNA聚合酶，具体取决于RNA类型和序列需求。根据治疗目标，包含了如UTR、编码区、核糖体进入位点和多尾（多）尾部等关键元素。

IVT mRNA需要封盖步骤，在合成和纯化过程中会评估包帽效率、poly（A）添加和序列完整性等因素。还需要表达筛选以确认RNA被正确翻译并具功能活性。

注意事项：

1. LNP中使用的RNA类型是设计上的第一个关键考虑，因为siRNA、mRNA和环状RNA在长度、结构和序列需求上各不相同。即使只有最小必要的元素，根据靶细胞或组织的不同，仍可能需要额外的优化。

2. RNA组分主要由RNA类型决定。对于mRNA，需要未翻译区域（5'和3'的UTR）和多（A）尾部来稳定转录本并实现传递后翻译。虽然部分元素适用广泛，但特定的UTR可以增强某些细胞的表达，编码区的密码子优化还能进一步提高效率。

3. mRNA货物在合成过程中需要额外的封帽步骤。真核转录本自然带有5'帽，这是一种核苷酸类似物，能提高稳定性并对翻译至关重要。该帽可在IVT期间使用合成帽类似物添加，或在转录后的后续反应步骤中引入。市面上有不同的帽封类似物，其选择涉及平衡免疫原性和翻译效率。

4. RNA合成通常通过体外转录（IVT）进行，这需要线性DNA模板和特定启动子序列，使得重组RNA聚合酶如T7能够转录。IVT灵活，允许轻松掺入修饰核苷酸，且在条件优化后可扩展。模板可以通过限制酶消化、PCR或寡核苷酸组装生成。

5. RNA分析在LNP被封装前后进行。转录本首先通过色谱法纯化，去除过量核苷酸并评估纯度，随后验证其长度和序列的正确性。确认后，RNA被制备成LNPs，并重新检查其完整性，以确保在封装过程中没有降解或断裂。

LNP表述

成功的LNP制定需要几个关键考虑因素。设计必须考虑目标细胞或组织，以及可电离脂质包覆和释放货物的效果。货物合成应包括确保克隆过程中核酸成分稳定性和表达的元素，并可能涉及修饰核苷酸以降低免疫原性。

LNP组成部分

LNP的构建模块非常简单。典型的LNP包括可电离或阳离子脂、Chol、至少一种磷脂，以及一种聚乙二醇（PEG）修饰脂质。这些脂质成分用于保护或包裹编码治疗性蛋白的核酸货物。
货物类型从mRNA、siRNA到质粒DNA。

配方中脂质的选择受货物类型影响。

一旦产生足够的货物，初步制剂筛选会评估不同可电离脂质和组成如何与货物组装。下游分析不仅提供封装数据，更是评估配方成功的关键。最后，建议进行表达筛选，因为并非所有通过分析检验的配方都能产生功能性LNP。

注意事项：

1. LNPs的关键设计因素是可电离脂质，它控制货物的包裹和释放，并且必须与核酸类型（如dsDNA、mRNA、siRNA）相匹配。通过调整磷脂和PEG脂质的类型和比例，还可以进一步调节LNP的大小和表面电荷。

2. RNA LNPs的货物合成通常通过体外转录DNA模板完成。对于mRNA，根据目标组织或细胞类型选择非编码元件如UTR，以提高稳定性和翻译。帽结构的选择也必须提前规划，因为这可能取决于转录开始时的特定序列要求。

3. 一旦脂质和货物准备完成，LNP的配方将通过自动微流控混合器进行，以实现重复性。这些系统精确控制有机相脂质与水性货物的快速混合，并允许灵活调整混合比例，这对不同RNA类型非常重要。

4. 初步LNP分析侧重于测量货物封装。进一步的表征还包括颗粒大小、分子量、表面电荷和多分散性。配方和分析是筛选过程中的迭代过程，判断配方是否足够取决于这些关键参数。

5. 体外表达筛选是配方和分析后的补充步骤。虽然体外和体内结果可能不总是一致，但它能早期验证LNP的表现，并指导进一步筛查或体内检测的选择。使用已知高表达的基准LNP可以提高可靠性。

biozol Lipid Nanoparticles LP-01 试剂

LNP制剂中的可电离脂和辅助脂质

为支持LNP开发中的这些挑战，Echelon Biosciences提供一系列高品质的可电离和辅助脂质，用于研发应用。

可电离脂质

可电离脂质是构建成形脂质纳米颗粒的关键组成部分。这些特化脂质在酸性pH中获得正电荷，使其能够通过
磷酸基团与含有负电荷的核酸相互作用并封装其中。可电离脂质的筛选和选择基于核酸货物的类型、目标组织和治疗应用。

随着治疗靶细胞类型和RNA多样性的不断扩大，对新型可电离脂质的需求正在增长。Echelon的化学家们在脂质合成方面拥有多年经验，并积极向我们的产品目录添加新的可电离脂质。

上海宝叶生物科技有限公司

国内试剂耗材经销代理

国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

进出口货物代理服务。

公司代理众多生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。