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Codexis Codex KRED Screening Kit 试剂

产品简介

Codexis Codex KRED Screening Kit 试剂
酮还原酶(KRED)依赖 NAD (P) H 辅酶,将酮底物立体选择性还原为手性仲醇;试剂盒 24 株酶经过大量项目筛选,具备多样立体选择性,R‑构型、S‑构型产物均可覆盖,同时具备良好溶剂耐受性与热稳定性

更新时间:2026-08-19
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品牌其他品牌货号KRED-P1-B02
供货周期一个月应用领域医疗卫生,化工,生物产业,农林牧渔,制药/生物制药

Codexis Codex KRED Screening Kit 试剂

酮还原酶筛选试剂盒通用信息

・Codex® 酮还原酶(KRED)筛选试剂盒包含 24 种酮还原酶(KRED)酶。这些酶从 70 余个项目中筛选得到,具备底物适用范围广、立体选择性高且类型多样、稳定性优异的特点。该试剂盒可快速评估采用酮还原酶进行酮不对称还原反应的可行性。

・(NADPH 或 NADH)作为直接氢负离子供体。为避免使用化学计量的辅酶,同时推动反应平衡正向移动,辅酶会在反应体系内原位循环再生。Codex® 酮还原酶筛选试剂盒中的大多数酶以 NADPH 作为辅酶,可利用异丙醇作为还原剂,将氧化态辅酶还原为活性还原态。异丙醇还可用于溶解水溶性较差的底物。这类酶见下表中筛选流程 P 项下。

・Codex® 酮还原酶筛选试剂盒中部分酶无法有效利用异丙醇,该类酶见下表中筛选流程 N 项下。针对这类酶,使用葡萄糖作为还原剂,将氧化态辅酶还原为还原态。该再生反应由第二种酶 —— 葡萄糖脱氢酶(GDH)催化,该酶包含于酮还原酶循环再生混合试剂 N 中。

・酶粉建议储存温度为‑20 °C。

・Codex® 酮还原酶筛选试剂盒所提供的酶(每种 250 毫克)与循环再生混合试剂,足够按照提供的实验方案完成至少 20 次



Codexis Codex KRED Screening Kit 试剂

Codex® KRED 筛选试剂盒 —— 推荐筛选操作流程

操作步骤

流程 P(酮还原酶 KRED 1‑19) 流程 N(酮还原酶 KRED 20‑24)① 酮还原酶(KRED)  分装称量・从 Codex® 酮还原酶筛选试剂盒中,分别称取约 10 毫克的每种酮还原酶,置于做好标记的小瓶中 ——2 mL 离心管十分适用,可直接在该管内完成反应淬灭与产物提取;也可选用带磁力搅拌功能的小型玻璃样品瓶。
② 循环混合液  复溶配制 *・每完成一组完整筛选,取 300 mg 干粉型酮还原酶循环混合液 P,加入 15 mL 去离子水,充分搅拌至全部固体溶解。・向上述溶液中加入 1.5 mL 异丙醇,混匀。・每完成一组完整筛选,取 150 mg 干粉型酮还原酶循环混合液 N,加入 3 mL 去离子水,充分搅拌至全部固体溶解(该溶液不可添加异丙醇)。
③ 底物溶液・将约 100 mg 酮类底物溶解于 0.9 mL 二甲基亚砜(DMSO)中。・若该酮类底物无法溶于二甲基亚砜,可改用纯水、缓冲液或 50% 二甲基亚砜‑水溶液进行溶解。
④ 反应启动・向装有酮还原酶的各样品管中,分别加入 475 µL 已复溶、含异丙醇的酮还原酶循环混合液 P。・向各样品管中加入 25 µL 二甲基亚砜配制的底物溶液。・向装有酮还原酶的各样品管中,分别加入 475 µL 已复溶的酮还原酶循环混合液 N。・向各样品管中加入 25 µL 二甲基亚砜配制的底物溶液。
⑤ 过夜孵育・将反应体系置于 30 ℃条件下振荡孵育约 24 小时。振荡混匀可采用试管振荡仪、磁力搅拌,或将样品瓶横放在摇床中振荡,也可选用其他能够实现充分混匀的方式。
⑥ 反应后处理与检测分析・反相高效液相色谱(HPLC)检测推荐前处理:加入 1 mL 乙腈终止反应,充分混匀数分钟后离心,使变性蛋白及其他不溶物沉淀。必要时,可使用 50% 乙腈‑水溶液对淬灭澄清后的样品进行稀释,再上机检测。・正相高效液相色谱(HPLC)或气相色谱(GC)检测推荐前处理:加入 1 mL 甲基叔丁基醚、乙酸乙酯或同类有机溶剂,完成反应淬灭与产物提取;充分混匀后离心。







上海宝叶生物科技有限公司

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