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『安全』是进行任何实验zui重要的考量，若不留意，经常会造成*的遗憾，因此，请遵守以下各项规定：1.请事先勘查紧急冲洗站、洗眼台及灭火器的位置。2.请避免穿着凉鞋或拖鞋（脚趾不要裸露），并请穿着实验衣。留长发者，在实验进行前将头发束好。3.在实验室请勿吸烟、化妆、嚼口香糖、吃东西、喝饮料。食物不可存放于实验室的冰箱中。4.实验前后请将工作区域清理擦拭干净，实验中打翻任何药品试剂时，要随时清理；离开实验室前请记得洗手。5.使用刻度吸管时，切勿用嘴吸取，请用安全吸球或吸管唧筒。6...
微量移液器（micropipet）是进行生化实验或分子生物学实验的*工具，然而使用方法的正确与否，以及微量移液器的准确性，都直接影响了实验结果的正确性，故请对你持有之微量移液器作深入的认识。本实验室所使用的微量移液器为GilsonPipetmanP系列，包括P1000,P200,P20等。以下使用方法及注意事项，部份取材自原厂所附說明书，请详读之后才进行实验。1）请参照图1.1，认识微量移液器每一部份组件之位置及名称。2）将D（ejector）取下，C（connectingn...
仪器用具：迷你电泳槽及铸胶器（MupidII）；UVtransilluminator及影像分析系统；防护面罩药品试剂：琼脂糖粉末（agarose,lowEEO）1×TAE电泳缓冲液（40mMTris-acetate,1mMEDTA,pH8.0）：由50×TAE（每1L含242gTrisbase,57.1mLglacialaceticacid,100mL的0.5MEDTA-8.0）稀释使用。10×追踪染剂（0.25%bromophenolblue,0.25%xylenecyan...
仪器用具：37℃及65℃水浴或恒温槽药品试剂：质体pBluescriptIISK（-）限制酶：BamHI,PvuII及ScaI（浓度均为10units/μL,Invitrogen）10×Reactionbuffer6（0.5MTris-HCl,pH7.4;60mMMgCl2;0.5MNaCl;0.5MKCl）无菌水方法步骤：1）取7支微量离心管，依下表所列体积（单位μL）依序加于管壁不同位置上。◆每次吸取限制酶时，请换一支新的微量移液器头以免造成污染。总体积为20μL，短暂离...
方法步骤：1）前一天转形的培养皿，当菌落长至约0.5mm大小时，将培养皿移至4℃放置1h。2）准备一张无菌的硝化纤维滤膜，以铅笔在边缘标上组别。◆请戴手套后再拿取滤膜！3）打开培养皿盖子，以两支扁平镊子将滤膜两边夹住，轻轻覆盖在菌落上方，尽可能避免有气泡产生。◆注意！滤膜覆盖上去后就不要再移动！4）等滤膜*湿透后，以针头在滤膜边缘戳洞做记号（至少做三个记号）。小心把滤膜掀起，菌落朝上放置在LB/Amp/IPTGplate上。盖上盖子，在37℃培养2~4h，以诱导启动T5pro...
仪器用具：平端镊子药品试剂：Nitrocellulose滤膜LB/Amp/IPTG/X-Glucplate（LBplate添加100μg/mLampicillin,0.2MIPTG,50μg/mLX-Gluc）方法步骤：1）前一天进行转形的培养皿，当菌落长至约0.5mm大小时，将培养皿移至4℃放置至少1h。2）准备一张无菌的硝化纤维滤膜，以铅笔在边缘标上组别。◆请戴手套后再拿取滤膜！3）打开培养皿盖子，以两支扁平镊子将滤膜两边夹住，轻轻覆盖在菌落上方，尽可能避免有气泡产生。◆...
方法步骤：1）吸取20μL的蛋白质样本，小心注入微量滴定盘中，避免气泡产生。2）每一样品槽加入200μL基质液，混合均匀；可用烧热的接种环去除气泡。3）静置约1~2min，颜色开始加深，然后加入30μL终止液。反应时间的长短，要以样本中的酶活性大小來做调整。因为我们只测定色析法各分划的相对酶活性，因此并不加终止液。4）以ELISA光度计测定波长415nm的吸光值。酶活性单位的测定：a.以上步骤，只可测定GUS活性的相对大小，对色析法所得到的各个分划进行侦测，相当方便，但并非酶...
方法步骤：1）尿素洗过夜的转印纸再以10mLPBST洗三次，每次约10min，均在上述方形培养皿中进行。2）转印纸放在明胶NET溶液中反应，置室温中反应1h。一般使用方形培养皿当容器，但亦可装入塑料袋中反应，较节省试剂用量。3）反应后，以PBST浸洗二次。4）把转印纸放在抗体溶液中反应，置室温反应1h。5）反应后以PBST洗三次，改用酶联体反应，在室温下反应1h。6）以PBST洗四至五次，注意容器也要洗干净。7）加入DAB基质溶液约10mL呈色，尽量避光，并且不时摇动呈色液。...
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